产品名称：人细胞间粘附分子1（ICAM-1）ELISA试剂盒

英文名称：Human ICAM-1 ELISA Kit

产品货号：XFH12875

规格：48T/96T

储存条件：2-8℃

有效期：6个月

用途：本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人细胞间粘附分子1（ICAM-1）的含量。

本产品仅供科研实验用，不做其他用途！

背景介绍：

ICAM-1（细胞间粘附分子1）也被称为CD54（分化簇54），是一种蛋白质，由ICAM1基因编码，通常在内皮细胞和免疫系统细胞中表达。它与CD11a/CD18或CD11b/CD18型整合素结合，也被鼻病毒利用作为进入呼吸道上皮的受体。ICAM-1是免疫球蛋白超家族的一个成员，该超家族的蛋白质包括抗体和T细胞受体。它是一种跨膜蛋白，拥有一个氨基端胞外结构域、一个跨膜结构域和一个羧基端胞质结构域。

检测原理：

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人细胞间粘附分子1（ICAM-1）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并彻-底洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人细胞间粘附分子1（ICAM-1）呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），计算样品浓度。

特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应

重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15%

样品收集、处理及保存方法

以下只是列出样品采集的一般指南。所有样本采集过程中，不得使用叠氮钠做为防腐剂。

1.  血清：使用不含热原和内毒素的试管，操作过程中避免任何细胞刺激，将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

2.  血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

3.  细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

4.  组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织-剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

注：标本溶血会影响最后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

5.  保存：如果样本收集后不及时检测，请按一次用量分装，冻存于-20℃，避免反复冻融，在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

人细胞间粘附分子1（ICAM-1）ELISA试剂盒