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3xFLAG peptide

3xFLAG peptide

简要描述:南京信帆生物是国内专注于生物化学领域的生物公司。公司以人为本,致力于追求企业的发展,以创新为根本,不断优化运作,致力于建立可衡量的持续改进的市场、研发、生物试剂及供应体系,研究开发*的检测技术及产品。3xFLAG peptide所有产品仅供科研使用,不得用于食用,医疗等其它用途。

产品型号:

所属分类:生物试剂

更新时间:2024-12-13

厂商性质:其他

详情介绍

南京信帆生物对质量的控制涵盖生物试剂、放行、市场质量反馈的全过程,包括原辅料、包装材料、工艺用水、中间过程及成品的质量标准和分析方法的建立、取样、检验和产品稳定性考察和市场不良反馈样品的复核等工作,确保产品品质。信帆生物致力于追求企业的发展,以创新为根本,不断优化运作,为每一位科研用户提供更优质的产品和更热情的服务。

10MG/[920.00]

3xFLAG peptide

简介:3X FLAG Peptide是一个合成的含有三个重复DYKXXD氨基酸序列的多肽。

氨基酸序列:MDYKDHDGDYKDHDIDYKDDDDK(简称)

N-Met-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Gly-Asp-Tyr-Lys-Asp-His-Asp-Ile-Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-Lys-C(全称)

分子式:C120H169N31O49S 分子量:2861.87

技术指标

外观:冻干粉

纯度:>95% by LC-MS

溶解性:water 2mg/ML; TBS (5mg/ml);

储存条件:-20

运输条件:常温运输

用途:蛋白洗脱;科研试剂。

使用方法推荐(来自公开文献仅供参考)

一:常见储存液或者工作液配置方法

储存液配置:3xFLAG peptide溶于1XTBS(pH7.4),浓度为5mg/ml; 分装储存于-20℃,避免反复冻融。

工作液配置:3xFLAG -peptide常用工作液浓度为100ug/ml,可用于从Anti-FLAG M2亲和凝胶上洗脱3xFLAG融合蛋白。5倍柱体积的工作溶液即可充分洗脱大部分3xFLAG融合蛋白

二:F

哺乳动物细胞FLAG标签蛋白纯化方案

一般注释以下方案基于并优化了哺乳动物细胞(U2OS)中FLAG标记蛋白的过表达,该细胞生长在一个10平方厘米的平板上,以90%的融合率转染,并在48小时后收获。该方案适用于相互作用蛋白的共纯化(基于FLAG-Ring1B/Bmi1)。

1重新悬浮和Sonicate细胞将冷冻的哺乳动物细胞沉淀重新悬浮在2 mL FLAG纯化悬浮缓冲液(1XPBS、1mM DTT、1X蛋白酶抑制剂)中。为了保持酶活性,这种再悬浮缓冲液不含任何裂解剂。除了超声波处理(1%Triton X或其他)外,非用于活性采集的纯化物还可以使用实际的裂解缓冲液。该方案仅使用超声波处理。

将混合物转移到干净的2 mL微管中,用Misonix XL-2000声波仪上的“振幅设置1[共20个]"超声处理2次,每次持续10秒,中间暂停1分钟。

2制备细胞裂解物并用磁珠孵育。在4℃下以12000 g离心细胞裂解物20分钟,使裂解物碎片沉淀。

使用2mL“微量"纯化柱,用2mL FLAG纯化悬浮缓冲液冲洗柱。

将100µL M2 FLAG亲和珠转移到柱中,用2 mL FLAG纯化悬浮缓冲液洗掉凝胶。

干燥柱鼻(底部),并用盖子紧紧盖上,然后转移离心机中的上清液




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