外泌体提取实验

服务介绍：

　　外泌体(exosome)：是细胞主动向胞外分泌的大小均一(40-200nm)的囊泡样小体，该囊泡可携带多种蛋白质、mRNA、miRNA等，参与细胞通讯、细胞迁移、血管新生和肿瘤细胞生长等过程。根据外泌体的大小和密度，用不同的离心速度，达到分离出外泌体的超速(差速)离心法，是学术上用的比较多且较认可的外泌体的提取方法，被认为是外泌体提取的黄金方法。

Ref: Huilin Shao et al,New Technologies for Analysis of Extracellular Vesicles,Chem.Rev. 2018,118:1917-1950

　　外泌体应用领域：

　　外泌体参与不同细胞间的物质传输和信号传递;

　　外泌体具备一些免疫调节功能(由于有大量免疫相关分子：抗原传递分子、热休克蛋白等);

　　外泌体参与细胞废物的排泄和处理;

　　不同来源的外泌体有其特异性，存在着不一样的功能;

　　外泌体已广泛的被用在医学临床疾病的诊断以及相关预防研究上;

　　外泌体可能被当做一种药物的载体等

　　实验流程：

　　低速离心去除碎片-过滤-高速离心-超速离心-蛋白浓度检测

注：外泌体提取后，可另收费进行电镜负染和WB检测（tsg101，cd9，cd63三选二）

外泌体提取实验

　　送样运输要求：

　　细胞上清样本：一个样本提供70ml的培养上清(细胞在含常规FBS培养基中培养一定时间，待细胞融合度约为60% - 70%时，移去原有含FBS的培养基，换成新鲜的含无外泌体血清的培养基，继续培养3天左右，细胞融合度达到80%-95%左右时，收取细胞上清），干冰运输到实验室。

　　血清样本：血液经普通采集后室温静置30min，3000g离心15min，收集上层血清，5ml，-80℃纯干冰运输。